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納豆激酶檢測

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2014/07/28 15:16
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【摘要】:
操作程序1-1).制作生理鹽水緩沖液準備鵬酸和鵬酸鈉。鵬酸屬酸性,鵬酸鈉屬堿性。制作0.5ml的鵬酸生理鹽水和0.5ml的鵬酸鈉生理鹽水。將ph值調整到7.8。1-2).加入纖維蛋白原準備纖維蛋白原。將纖維蛋白原以0.4%的比例添加到已準備好的緩沖液中。此時必須注意的是0.4%的添加比例。纖維蛋白原沒有100%的純品。0.4%是純品的換算值。一般在標簽上會標明濃度。如果濃度為50%,則纖維蛋白原按

操作程序

1-1).制作生理鹽水緩沖液

準備鵬酸和鵬酸鈉。

鵬酸屬酸性,鵬酸鈉屬堿性。

制作0.5ml的鵬酸生理鹽水和0.5ml的鵬酸鈉生理鹽水。將ph值調整到7.8。

1-2).加入纖維蛋白原

準備纖維蛋白原。

將纖維蛋白原以0.4%的比例添加到已準備好的緩沖液中。

此時必須注意的是0.4%的添加比例。

纖維蛋白原沒有100%的純品。

0.4%是純品的換算值。

一般在標簽上會標明濃度。

如果濃度為50%,則纖維蛋白原按0.8%的比例添加;

如果濃度為80%,則纖維蛋白原按0.5%的比例添加。

1-3).制作牛凝血酶溶液

準備牛凝血酶

將50U的牛凝血酶放入1ml的生理鹽水中溶解

1-4).制作plate

將(1-2)中所做的緩沖液10ml注入玻璃容器中。再將已制成的牛凝血酶0.5ml注入容器,攪拌凝固。這一步的操作手法如果不好的話,在均勻地混合攪拌以前就會凝固。另外,攪拌中如果混入雜質也不容易溶解。

(注:在容器中操作如果有困難的話,可以在試管中混合、攪拌;或是在廢棄的注射器中混合、攪拌)

2-1)incubate

制作納豆激酶溶液。

如果僅僅只是測試有無活性,則濃度多少隨意。

如果是以鳥激酶為指標作對比實驗,則需嚴格控制濃度。

納豆激酶溶液每10μl 測定點位。

spotting后的容器在37度常溫下incubate

(使用孵化器也可)

2-2)測定面積

纖維蛋白在溶解后會形成圓形物。

在2小時以后、4小時以后、24小時以后測量圓的面積。

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